网站首页新闻动态 > 使用DNA提取试剂盒的注意事项有哪些
使用DNA提取试剂盒的注意事项有哪些
发布时间:2022-03-25 点击量:65
   DNA提取试剂盒能提取所有类型土壤,以及包括粪便、肠内容物、生物固体等环境样品的微生物总DNA。堆肥、底泥沉积物、粪肥等样品的DNA纯度非常高,可直接用于所有PCR、QPCR等下游实验。PCR分析已经证明可成功提取所有类型环境微生物,包括格兰性阴阳性菌、真菌、藻类、放线菌和线虫等。
 
  DNA提取试剂盒的注意事项:
  1、由于样品不同,提取的DNA含量和纯度也有所不同,一般来说,如果所提取DNA用电泳的方法检测不到,PCR会有结果,样品尽可能的新鲜。否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
 
  2、若试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。
 
  3、如果样品消化不彻底,后面的离心步骤中可能会出现堵柱子的情况,可适当延长离心时间。
 
  4、洗脱缓冲液的体积不少于50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其在可用NaOH将水的pH值调至此范围,pH值低于会降低洗脱效率;DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。
 
  5、DNA浓度及纯度检测(浓度较高时):得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
QQ在线客服
电话咨询
  • 18612708765