网站首页新闻动态 > RNA提取使用正确的细胞或组织储存条件
RNA提取使用正确的细胞或组织储存条件
发布时间:2021-04-19 点击量:24
   RNA提取利用硅胶膜特异性吸附原理实现核酸分离,即根据缓冲液体系的盐离子浓度和PH值与柱子上的Si基质(树脂)结合RNA的方式绑定RNA,其优点在于重复性好、回收率高且操作简便。
 
  RNA提取使用正确的细胞或组织储存条件:
  在样品用液氮瞬间冻结之后,应该储存在°C冻。即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻,也会损失。瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉,行匀浆。RNAfixer使样品储存更为便利。储存在RNAfixer中的细胞保存长达1个星期,在4°C可稳定保存长达1个月,或长期。
 
  消除环境RNase污染
  为了得到,在整个RNA制备过程中,当RNA离开强蛋白变性剂(如离液裂解避免引入新的RNase污染就非常关键。由于RNase几乎是无所不以纯化的RNA接触的每一样东西都是无RNase污染的。所有的表面,液工台、玻璃器皿和制胶设备,都必须用表面去污净化溶液如RNase喷雾清去除各种溶液或者反应缓冲液中可能存在的RNase污染,可以用RNAsafe。一直使用无RNase的枪头、试管和溶液,手套也应经常更换。
 
  RNA提取的注意事项:
  1.异丙醇、乙醇都应用未开封的,75%的乙醇用移液枪配制,勿用量筒等中间器皿。
 
  2.整个过程要及时更换手套,戴双层口罩,并在操作区开启酒精灯。
 
  3.RNA一定要贮存到-70℃冰箱,在-20℃保存时间很短。
 
  4.配制的溶液应用灭菌处理的DEPC水。
 
  5.移液器:RNase的又一污染源是移液器。根据移液器制造商的要求对移液器进行处理。一般情况下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗移液器的内部和外部,基本达到要求。

上一篇:没有了

下一篇:细菌DNA的提取的实验原理和使用方法

QQ在线客服
电话咨询
  • 18612708765