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DNA文库构建的使用步骤和注意事项
发布时间:2020-07-16 点击量:109
   DNA文库构建是指含一种生物体所有基因编码的cDNA分子的克隆群。cDNA以组织细胞中的mRNA为模板,反转录合成双链cDNA,各cDNA分子分别插入载体形成重组子,再导入宿主细胞克隆扩增。这些在重组体内的cDNA集合即cDNA文库。cDNA文库在研究个体发育、细胞分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值,是研究工作中常使用到的基因文库。
 
  DNA文库构建实现了DNA的片段化、末端修复和3'端dA尾添加在一管内一步法完成,同时所得产物无需纯化,可直接用于adapter的连接。另外,本试剂盒配备的PCR扩增试剂经过专门的优化,扩增所得DNA序列产量高,保真度好、无碱基偏好性。
  本产品采用一步法的反应流程,省去了多步纯化步骤,整个建库流程仅需2.5hr;文库转化效率更高,可对微量DNA样本进行高效的文库构建。
 
  DNA文库构建使用注意事项:
  1.操作过程请注意避免核酸样品和产物之间的交又污染。
  2.请使用不含RWA酶或DW酶的枪头、EP管进行试验。
  3.试验开始前,请清洁操作台,并使用酶及W4酶清除试剂。确保没有RW4酶和D的污染。
  4.进行文库扩增前,请确保PCR仪已经调试好并处于稳定的状。
  5.试验前请仔细闻读说明书,如果需要暂停试验,或者无需立即进行下游试验。可根据说明书推荐将试验产物保存于-20℃并安排后续试验。
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