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细菌DNA提取使用方法是怎样的?
发布时间:2021-09-26 点击量:26
   细菌DNA提取适合于从<1.5x109个细菌中提取高纯度的DNA,也适合从组织、血液、分泌液或拭子等样品提取得到寄生的微生物DNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀,整个提取过程只需60分钟。得到的DNA可直接用于PCR、酶切、SouthernBlot、酶切、一代测序和二代测序等实验。该方案得到的DNA包括有基因组DNA和质粒DNA。
 
  细菌DNA提取的使用方法:
  柱式细菌DNA提取试剂盒注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
  1、样本处理(样本处理区)
  待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
 
  2、扩增试剂准备(PCR前准备区)
  取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMDRT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根据每头份用量计算N+1份FMDRT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20μl至单个PCR反应管)。
  组分每头份用量FMDRT-PCR反应液19μlRT-PCR酶。
  1.将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
  2.加样(样本处理区)
  3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。

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