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Tn5文库构建的载体选用和产品亮点
发布时间:2020-07-28 点击量:80
   Tn5文库构建将某种生物细胞的整个基因组DNA切割成大小合适的片段,并将所有的这些片段都与适当的载体连接,引入相应的宿主细胞中保存和扩增。
  Tn5文库构建的载体选用:载体能够容载的DNA的片段大小直接影响到构建完整的基因文库所需要的重组子的数目。载体要求容量大,所要求的DNA的片段数目越少,所需的重组子越少。
  cDNA克隆的基本过程是通过一系列酶催化反应,使poly(A)mRNA转变成双链cDNA群体并插入到适当的载体分子上,转化寄主细胞,构建包含所有基因编码序列的cDNA基因文库。
  在研究过程中,多采用酵母单杂或双杂进行文库构建。这项技术在植物的自交不亲和机理研究,病毒蛋白筛选,转录因子等信号通路蛋白筛选,癌症医学与寄生虫医学的凋亡相关蛋白和半乳糖凝集素互作蛋白筛选等多个领域有广泛的应用作用。
 
  Tn5文库构建的产品亮点:
  1、整个建库流程包括:RNA逆转录、RNA/cDNA杂合链的片段化、链置换和PCR扩增,整个反应在同一管中完成,总体耗时仅需2h,手动操作时间少于15min。
 
  2、该试剂盒共有三种规格,分别适用于投入RNA量为100ng、10ng和1ng的建库反应,可根据实验类型进行选择。
 
  3、兼容不同应用,可根据需要选择进行普通转录组或总RNA经rRNA去除后的RNA文库构建。
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