DNaseI是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。水解单链或双链DNA后的产物,5'端为磷酸基团,3'端为羟基。活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
产品特点:
1.简单快速,条件经过优化,一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA。
2.确保RNasefree,可以保证RNA分子完整性。
3.兼容性广,可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化,不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA。
DNaseI的注意事项:
1.经常更换新手套,因皮肤可能导致RNase污染。
2.使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
3.RNA在裂解液RZ中时不会被RNase降解,但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿,玻璃器皿可在150℃烘烤4h,塑料器皿可在0.5MNaOH中浸泡10min,然后用水彻底洗净,再高压灭菌。
4.配制溶液应使用无RNase的水,(将水加到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(V/V)放置过夜,高压灭菌)
5.样品应避免反复冻融,否则会影响RNA的提取得率和质量。
6.本试剂盒不能用于冷冻血液RNA的提取。